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Moyens à la recherche - Laboratoire d'Océanographie de Villefranche-sur-Mer
Unité Mixte de Recherche 7093 – CNRS/UPMC

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Plate-forme d’analyses biochimiques

La plateforme d’analyses biochimiques du LOV permet essentiellement d’analyser des lipides, mais également de doser des sucres totaux, des protéines, de la chlorophylle…

La plateforme analytique du LOV permet ces différentes analyses sur des lipides d’origine planctonique :

    • Extraction des lipides selon la méthode de Bligh and Dyer : présence d’homogénéiseurs et de verreries de différentes tailles permettant l’adaptation selon la charge lipidique ou le type de tissus biologiques à extraire. Pesée des masses extraites sur balance de précision.
    • Quantification des différentes classes de lipides présentes (les différentes classes de lipides neutres, de glycolipides ou de phospholipides) par Chromatographie sur Couches Minces (CCM) couplée à une détection FID sur Iatroscan New MK5 (Iatron). Application automatisée des lipides à analyser sur les chromarods, sur un autospotteur NTS Maxxi 3000.

 

    • Purification des classes de lipides : lipides neutres (Cires, TG, stérols…) ou polaires (différentes classes de glycolipides et de phospholipides) sur colonne Extract Clean SPE ou sur Chromatographie sur Couches Minces (CCM).
    • Quantification des acides gras totaux ou spécifiques d’une classe de lipides purifiée, par Chromatographie en Phase Gazeuse (CPG) avec détection FID. La plateforme dispose de 2 Chromatographes Perkin Elmer : un Autosystem XL, équipé d’un passeur automatique d’échantillons, et un Clarus 600.

 

 

Pour les évaporations de solvants, la plateforme est équipée de deux évaporateurs rotatifs, contrôlés par un groupe de pompage haut vide.

Les échantillons à analyser sont conservés dans un surgélateur à -80°C.

Deux centrifugeuses dont une réfrigérée sont utilisées pour les phases d’extraction ou d’analyses.

Autres analyses biochimiques possibles :

    • Dosage de la chlorophylle ou de contenus stomacaux par fluorimétrie ou par spectrophotométrie.
    • Dosage de sucres ou de protéines par spectrophotométrie (spectrophotomètre Perkin Elmer).
    • Dosages enzymatiques (présence d’un automate enzymatique).
    • Détermination de poids secs et rapports poids frais/poids secs.

Contact : Marc Boutoute - Tél: 04 93 76 38 42 - Marc.Boutoute -at- obs-vlfr.fr

LOV - 08/04/14